原位雜交（fish）是指將特定標記的已知序列核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。
原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行，也可以檢測兩個靶基因的共定位情況。
病理檢測
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原位雜交（FISH）
? 產品介紹
? 載基優勢
1.采用進口abcam、CST、Santa、omnimabs抗體；
2.可免費使用我司細胞庫、組織庫已有細胞或石蠟切片，無需購買；
3.提供完整的實驗數據及實驗報告(包括實驗儀器、試劑、方法步驟、結果、數據分析、結論等)。
? 實驗流程
? 實驗步驟
1.石蠟切片常規脫蠟至水，用免疫組化筆畫圈。
2.消化：根據組織固定時間長短，切片置于修復液中煮沸10-15min，自然冷卻。后組化筆畫圈，根據不同組織不同指標特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。純水沖洗后PBS洗3次×5min。根據切片情況選擇最佳消化時間。
3.預雜交：滴加預雜交液，37°C孵育1h。
4.雜交：傾去預雜交液，滴加含探針雜交液,恒溫箱37℃雜交過夜。
5.雜交后洗滌：洗去雜交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體教多，可以增加甲酰胺洗滌。
6.DAPI復染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片后于熒光顯微鏡下觀察。
? 結果示例
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
2.可免費使用我司細胞庫、組織庫已有細胞或石蠟切片，無需購買；
3.提供完整的實驗數據及實驗報告(包括實驗儀器、試劑、方法步驟、結果、數據分析、結論等)。
DAB實驗：制備石蠟切片-阻斷-雜交-封閉-滴加anti-DIG-HRP試劑-DAB顯色-復染細胞核-封片鏡檢
客戶提供：提供固定后的樣本/包埋后的蠟塊/切片和原位雜交試劑盒，固定液樣本、蠟塊常溫運輸；石蠟切片冰袋運輸；細胞爬片加原位雜交固定液固定15min后，換無酶PBS，密封，冰袋運輸；原位雜交試劑盒冰袋運輸。
? 實驗步驟
1.石蠟切片常規脫蠟至水，用免疫組化筆畫圈。
2.消化：根據組織固定時間長短，切片置于修復液中煮沸10-15min，自然冷卻。后組化筆畫圈，根據不同組織不同指標特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。純水沖洗后PBS洗3次×5min。根據切片情況選擇最佳消化時間。
3.預雜交：滴加預雜交液，37°C孵育1h。
4.雜交：傾去預雜交液，滴加含探針雜交液,恒溫箱37℃雜交過夜。
5.雜交后洗滌：洗去雜交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體教多，可以增加甲酰胺洗滌。
6.DAPI復染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片后于熒光顯微鏡下觀察。
? 結果示例
L929細胞:
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
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