疾病模型＆免疫缺陷鼠
NOD—SCID小鼠
通過基因編輯技術，在非肥胖性糖尿病小鼠（NOD）品系上引入 Prkdc（Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide，又名 scid）基因突變，從而建立的新型免疫缺陷小鼠。
特征
1.NOD-SCID 小鼠既擁有 C.B-17 SCID 小鼠的特征，缺乏適應性免疫系統，不再發生自發免疫性糖尿病，同 時還表現出 NOD 小鼠所具有的多種固有免疫缺陷，包括NK細胞活性低、沒有溶血補體活性，骨髓發育缺陷，是一種更易于異種移植成功并可穩定應用的動物模型。
2.NOD-SCID 小鼠的壽命一般為8-9個月，因此不適用于長期移植實驗。
用途
1.同種和異種腫瘤移植：血清免疫球蛋白 Ig 泄漏率低于 SCID小鼠，腫瘤成活率高。
2.血液學實驗研究：建立人類白血病模型、干細胞移植、藥物研究等研究。
3.免疫學及炎癥研究。
4.糖尿病和肥胖研究： I型糖尿病。
成長曲線
生理生化數據
NOD-SCID小鼠淋巴細胞和NK細胞驗證：
基因鑒定報告：
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樣本信息和目的：
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樣本：NOD-SCID小鼠
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目的：確認NOD-SCID小鼠基因修飾類型
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靶基因：Prkdc Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide
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NCBI號：19090
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NCBI鏈接：https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/19090
方法和結果
PRKDC（Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide，DNA 依賴性蛋白激酶，又名 scid）能識別和傳遞 DNA 斷裂損傷信號，當細胞 DNA 發生斷裂損傷后，PRKDC 復合物就聚合在損傷位點上，隨之蛋白激酶被活化，募集并磷酸化其下游的 DNA 修復蛋白啟動 DNA 斷裂修復。此外，PRKDC 在維持端粒穩定性，免疫蛋白質的位置特異性重組中也發揮重要的作用。Prkdc 基因位于小鼠 16 號染色體上，有 87 個外顯子。
查詢 Prkdc 基因的轉錄本信息進行各外顯子序列的檢測，結果發現 Prkdc 基因有多個轉錄本，選擇轉錄本 Prkdc-201 ENSMUST00000023352.8（如圖 2）為模板進行引物設計、和測序比對： http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Tran/Sequence_cDNA?db=core;g=ENSMUSG00000022672; r=16:15637889-15842235; t=ENSMUST00000023352以 Prkdc 基因DNA為模板，設計 86 個外顯子的擴增測序引 物，并把 PCR 產物進行 Sanger 測序，并于報告模板進行比對，結果顯示 Prkdc 基因 85 號外顯子顯示出一個堿基的改變，其他有少量由于產物兩端測序質量不好導致的序列不擬合被忽略掉。
Prkdc 基因 85 號外顯子發生單核苷酸改變（T 突變為 A）后，提前引入終止密碼子，導致蛋白翻譯提前終止。堿基突變后 PRKDC 蛋白預測將截短 83個氨基酸。
結論
斯貝福（北京）生物技術有限公司 NOD-SCID 小鼠的基因編輯類型為：Prkdc 基因 85 號外顯子單堿基發生突變，提前引入終止密碼子，導致蛋白翻譯提前終止。
